目錄Contents

第一章 基礎(chǔ)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)
一、微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室安全教育
二、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備--玻璃器皿的洗滌、包扎和滅菌
三、培養(yǎng)基的配制與滅菌
實(shí)驗(yàn)1細(xì)菌培養(yǎng)基的配制與滅菌
實(shí)驗(yàn)2酵母菌及霉菌培養(yǎng)基的配制與滅菌
實(shí)驗(yàn)3放線(xiàn)菌培養(yǎng)基的配制與滅菌
四、微生物接種技術(shù)
實(shí)驗(yàn)4細(xì)菌的接種和培養(yǎng)
實(shí)驗(yàn)5酵母和霉菌的接種與培養(yǎng)
五、微生物的制片染色及形態(tài)觀察
實(shí)驗(yàn)6普通光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)和使用
實(shí)驗(yàn)7細(xì)菌染色與形態(tài)觀察
實(shí)驗(yàn)8放線(xiàn)菌的接種與形態(tài)觀察
實(shí)驗(yàn)9酵母菌水浸片制備、形態(tài)觀察及死亡率的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)10霉菌的形態(tài)觀察
六、微生物的生長(zhǎng)測(cè)定
實(shí)驗(yàn)11酵母菌細(xì)胞大小的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)12酵母菌細(xì)胞計(jì)數(shù)和出芽率的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)13比濁法測(cè)定大腸桿菌的生長(zhǎng)曲線(xiàn)
七、微生物鑒定技術(shù)
實(shí)驗(yàn)14細(xì)菌的生理生化實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)15細(xì)菌的分子生物學(xué)鑒定
實(shí)驗(yàn)16真菌的分子生物學(xué)鑒定
八、樣品中菌落總數(shù)和大腸菌群檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)17菌落總數(shù)的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)18大腸菌群計(jì)數(shù)
九、細(xì)菌的分離篩選和發(fā)酵性能實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)19產(chǎn)蛋白酶的枯草芽孢桿菌的分離
實(shí)驗(yàn)20枯草芽孢桿菌產(chǎn)α-淀粉酶發(fā)酵實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)21乳酸細(xì)菌的乳酸發(fā)酵實(shí)驗(yàn)

第二章 微生物遺傳育種實(shí)驗(yàn)技術(shù)
實(shí)驗(yàn)1紫外線(xiàn)誘變育種--繪制細(xì)胞存活率和突變率曲線(xiàn)
實(shí)驗(yàn)2紫外線(xiàn)誘變育種--篩選蛋白酶高產(chǎn)菌株
實(shí)驗(yàn)3枯草芽孢桿菌營(yíng)養(yǎng)缺陷型遺傳標(biāo)記的制作
實(shí)驗(yàn)4細(xì)菌基因組DNA的提取
實(shí)驗(yàn)5DNA濃度和純度的檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)6瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)7聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）
實(shí)驗(yàn)8堿變性法提取大腸桿菌質(zhì)粒DNA
實(shí)驗(yàn)9大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備及質(zhì)粒轉(zhuǎn)化
實(shí)驗(yàn)10DNA的限制性酶切反應(yīng)
實(shí)驗(yàn)11重組質(zhì)粒的構(gòu)建、篩選及鑒定
實(shí)驗(yàn)12畢赤酵母感受態(tài)的制備及其轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)13大腸桿菌半乳糖基因高頻轉(zhuǎn)導(dǎo)

第三章 應(yīng)用微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)
第一節(jié)顯微技術(shù)
一、暗視野顯微鏡的使用
實(shí)驗(yàn)1暗視野顯微鏡使用舉例--細(xì)菌運(yùn)動(dòng)的觀察
二、相差顯微鏡的使用
實(shí)驗(yàn)2相差顯微鏡使用舉例--釀酒酵母細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)的觀察
三、熒光顯微鏡的使用
實(shí)驗(yàn)3熒光顯微鏡使用舉例--抗酸細(xì)菌的觀察
四、透射電子顯微鏡
實(shí)驗(yàn)4大腸桿菌透射電鏡樣品的制備與觀察
五、掃描電子顯微鏡
實(shí)驗(yàn)5大腸桿菌掃描電鏡樣品的制備與觀察
第二節(jié)除菌技術(shù)
一、物理除菌方法
二、化學(xué)除菌方法
三、各類(lèi)培養(yǎng)基常采用的滅菌方法及注意事項(xiàng)
四、無(wú)菌操作環(huán)境的消毒與滅菌
第三節(jié)微生物培養(yǎng)技術(shù)
一、微生物培養(yǎng)技術(shù)
實(shí)驗(yàn)6中高溫大曲制作實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)7厭氧袋法培養(yǎng)丙酮丁醇梭狀芽孢桿菌
實(shí)驗(yàn)8厭氧培養(yǎng)箱培養(yǎng)丙酮丁醇梭狀芽孢桿菌
二、同步培養(yǎng)技術(shù)
實(shí)驗(yàn)9選擇法獲得同步生長(zhǎng)酵母細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)技術(shù)
實(shí)驗(yàn)10誘導(dǎo)法獲得霉菌分生孢子同步生長(zhǎng)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)
三、透析培養(yǎng)技術(shù)
實(shí)驗(yàn)11乳酸桿菌與酵母菌的透析培養(yǎng)
四、高密度培養(yǎng)技術(shù)
實(shí)驗(yàn)12產(chǎn)乳球菌素的乳酸乳球菌的膜過(guò)濾培養(yǎng)
實(shí)驗(yàn)13簡(jiǎn)單節(jié)桿菌固定化轉(zhuǎn)化醋酸可的松實(shí)驗(yàn)
五、原位分離培養(yǎng)技術(shù)
實(shí)驗(yàn)14釀酒酵母酒精發(fā)酵的原位分離培養(yǎng)技術(shù)
六、補(bǔ)料分批培養(yǎng)技術(shù)
實(shí)驗(yàn)15產(chǎn)桿菌肽地衣芽孢桿菌的補(bǔ)料分批培養(yǎng)
七、固態(tài)發(fā)酵技術(shù)
實(shí)驗(yàn)16植酸酶的固態(tài)發(fā)酵
第四節(jié)染色技術(shù)及微生物細(xì)胞結(jié)構(gòu)觀察
一、微生物細(xì)胞染色與觀察
實(shí)驗(yàn)17酵母的負(fù)染色法
實(shí)驗(yàn)18真菌的熒光染色與觀察
實(shí)驗(yàn)19細(xì)菌的抗酸性染色法
二、微生物細(xì)胞染色與觀察
實(shí)驗(yàn)20細(xì)菌莢膜的染色與觀察
實(shí)驗(yàn)21細(xì)菌鞭毛的染色與觀察
實(shí)驗(yàn)22細(xì)菌芽孢的染色
第五節(jié)微生物生長(zhǎng)控制
一、生物量測(cè)定
二、生長(zhǎng)曲線(xiàn)測(cè)定
實(shí)驗(yàn)23平板計(jì)數(shù)法測(cè)定釀酒酵母的生長(zhǎng)曲線(xiàn)
實(shí)驗(yàn)24菌絲重量法測(cè)定絲狀真菌的生長(zhǎng)曲線(xiàn)
實(shí)驗(yàn)25核酸測(cè)定法繪制細(xì)菌的生長(zhǎng)曲線(xiàn)
三、微生物生長(zhǎng)代謝影響因素測(cè)定
實(shí)驗(yàn)26營(yíng)養(yǎng)因素對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響
實(shí)驗(yàn)27接種量對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響
實(shí)驗(yàn)28種齡對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響
實(shí)驗(yàn)29溫度對(duì)微生物生長(zhǎng)和代謝的影響
實(shí)驗(yàn)30pH對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響
實(shí)驗(yàn)31溶解氧對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響
實(shí)驗(yàn)32滲透壓對(duì)微生物生長(zhǎng)和代謝的影響
實(shí)驗(yàn)33表面活性劑對(duì)微生物生長(zhǎng)和代謝的影響
第六節(jié)微生物純種分離技術(shù)
一、純種分離技術(shù)和方法
二、細(xì)菌的分離
實(shí)驗(yàn)34酸乳制品中乳酸菌的分離
實(shí)驗(yàn)35產(chǎn)脂肪酶細(xì)菌的分離
實(shí)驗(yàn)36產(chǎn)淀粉酶細(xì)菌的分離
實(shí)驗(yàn)37醋酸菌的分離
實(shí)驗(yàn)38固氮菌的分離
實(shí)驗(yàn)39嗜鹽菌的分離
實(shí)驗(yàn)40硝化細(xì)菌的分離
實(shí)驗(yàn)41反硝化細(xì)菌的分離
實(shí)驗(yàn)42谷氨酸產(chǎn)生菌的分離
實(shí)驗(yàn)43雙歧桿菌的分離
三、放線(xiàn)菌的分離
實(shí)驗(yàn)44彈土分離法分離金色鏈霉菌
實(shí)驗(yàn)45諾卡氏菌的分離
實(shí)驗(yàn)46植物內(nèi)生放線(xiàn)菌的選擇性分離
四、酵母菌的分離
實(shí)驗(yàn)47酒曲中酵母菌的分離
實(shí)驗(yàn)48耐雙乙酰啤酒酵母菌的分離
實(shí)驗(yàn)49耐二氧化硫葡萄酒酵母菌的分離
實(shí)驗(yàn)50果汁中水解檸檬酸的酵母菌的分離
五、霉菌的分離
實(shí)驗(yàn)51產(chǎn)蛋白酶毛霉的分離
實(shí)驗(yàn)52甜酒曲中根霉菌的分離
實(shí)驗(yàn)53產(chǎn)檸檬酸黑曲霉的分離
實(shí)驗(yàn)54產(chǎn)右旋糖酐酶青霉的分離和培養(yǎng)
六、噬菌體的分離
實(shí)驗(yàn)55大腸桿菌噬菌體的分離與純化
第七節(jié)微生物分類(lèi)鑒定
一、細(xì)菌的分類(lèi)鑒定
實(shí)驗(yàn)5616S rDNA序列分析和進(jìn)化樹(shù)構(gòu)建
實(shí)驗(yàn)57細(xì)菌全基因組測(cè)序
實(shí)驗(yàn)58利用微生物快速測(cè)定儀對(duì)細(xì)菌進(jìn)行分類(lèi)
實(shí)驗(yàn)59淀粉水解試驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)60氧化酶試驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)61過(guò)氧化氫酶試驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)62酪蛋白分解試驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)63β-半乳糖苷酶試驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)64含碳化合物的利用試驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)65丙二酸鹽試驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)66葡萄糖銨試驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)67動(dòng)力試驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)68耐鹽試驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)69TTC試驗(yàn)
二、酵母菌和霉菌的分類(lèi)鑒定
實(shí)驗(yàn)70真核微生物18S rRNA/ITS序列的分離及測(cè)序分析
實(shí)驗(yàn)71利用微生物快速測(cè)定儀對(duì)真菌進(jìn)行分類(lèi)
實(shí)驗(yàn)72分解脂肪試驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)73類(lèi)淀粉化合物形成試驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)74尿素分解試驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)75楊梅苷分解試驗(yàn)
第八節(jié)微生物傳統(tǒng)誘變育種
一、概述
二、突變菌株的分離
實(shí)驗(yàn)76大腸桿菌鏈霉素抗性標(biāo)記制作
實(shí)驗(yàn)77反饋抑制調(diào)節(jié)突變型賴(lài)氨酸高產(chǎn)菌株篩選
實(shí)驗(yàn)78反饋抑制調(diào)節(jié)突變型卡那霉素高產(chǎn)菌株的選育
實(shí)驗(yàn)79釀酒酵母呼吸缺失突變株的篩選
實(shí)驗(yàn)80醬油曲霉溫度敏感型突變株的篩選
第九節(jié)微生物現(xiàn)代育種
一、概述
二、生物信息數(shù)據(jù)庫(kù)與查詢(xún)
三、基因工程基本操作
實(shí)驗(yàn)81酵母菌DNA的提取及檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)82絲狀真菌總RNA的提取及檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)83RT-PCR獲得真核生物的目的基因
實(shí)驗(yàn)84原核表達(dá)載體構(gòu)建及在宿主中表達(dá)
實(shí)驗(yàn)85真核表達(dá)載體構(gòu)建及在宿主中表達(dá)
實(shí)驗(yàn)86微生物cDNA文庫(kù)構(gòu)建技術(shù)
實(shí)驗(yàn)87PCR定點(diǎn)突變技術(shù)改造微生物菌種
四、細(xì)菌的轉(zhuǎn)化
實(shí)驗(yàn)88枯草桿菌染色體DNA的轉(zhuǎn)化
五、細(xì)菌的轉(zhuǎn)導(dǎo)
實(shí)驗(yàn)89枯草桿菌噬菌體的普遍轉(zhuǎn)導(dǎo)
六、細(xì)菌的接合
實(shí)驗(yàn)90大腸桿菌的接合
實(shí)驗(yàn)91絲狀真菌的轉(zhuǎn)化技術(shù)
七、原生質(zhì)體融合技術(shù)
實(shí)驗(yàn)92細(xì)菌原生質(zhì)體細(xì)胞融合
實(shí)驗(yàn)93酵母原生質(zhì)體細(xì)胞融合
實(shí)驗(yàn)94應(yīng)用原生質(zhì)體細(xì)胞融合技術(shù)選育醬油曲霉
實(shí)驗(yàn)95電誘導(dǎo)酵母與短梗霉屬屬間融合
八、微生物基因組洗牌育種技術(shù)
實(shí)驗(yàn)96釀酒酵母的基因組洗牌育種
第十節(jié)食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)97沙門(mén)氏菌檢驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)98志賀氏菌檢驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)99致瀉大腸埃希氏菌的檢驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)100副溶血性弧菌檢驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)101小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌檢驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)102金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)103β-溶血性鏈球菌檢驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)104肉毒梭菌及肉毒毒素的檢驗(yàn)
第十一節(jié)微生物菌種保藏
一、普通菌種保藏方法
實(shí)驗(yàn)105普通菌種保藏實(shí)驗(yàn)
二、特殊菌種保藏方法
實(shí)驗(yàn)106噬菌體和厭氧菌的保藏

附錄
附錄Ⅰ試劑
附錄Ⅱ培養(yǎng)基

參考文獻(xiàn)