第一章 概述
第一節(jié) 什么是流式細(xì)胞術(shù)？
第二節(jié) 流式細(xì)胞術(shù)能做什么？
第三節(jié) 背景與回顧
第四節(jié) 儀器簡介
一、 BD公司
二、 Beckman Coulter公司
三、 ABI公司
四、 Union Biometrica公司
五、 Apogee 公司
六、 Partec公司
七、 Merck Millipore公司
第五節(jié) 前景與展望
一、 流式細(xì)胞術(shù)與顯微技術(shù)結(jié)合
二、 流式細(xì)胞術(shù)與質(zhì)譜技術(shù)結(jié)合 第一章 概述
第一節(jié) 什么是流式細(xì)胞術(shù)？
第二節(jié) 流式細(xì)胞術(shù)能做什么？
第三節(jié) 背景與回顧
第四節(jié) 儀器簡介
一、 BD公司
二、 Beckman Coulter公司
三、 ABI公司
四、 Union Biometrica公司
五、 Apogee 公司
六、 Partec公司
七、 Merck Millipore公司
第五節(jié) 前景與展望
一、 流式細(xì)胞術(shù)與顯微技術(shù)結(jié)合
二、 流式細(xì)胞術(shù)與質(zhì)譜技術(shù)結(jié)合
參考文獻(xiàn)
第二章 流式細(xì)胞術(shù)原理
第一節(jié) 工作原理
第二節(jié) 液流系統(tǒng)
一、 鞘液
二、 噴嘴
三、 流式照射室
第三節(jié) 光學(xué)檢測系統(tǒng)
一、 激光和熒光
二、 激光照射液流
三、 光學(xué)信號
四、 光學(xué)元件
五、 光學(xué)信號檢測系統(tǒng)
第四節(jié) 電子控制系統(tǒng)
一、 光電檢測器
二、 通道
三、 閾值
小結(jié)
參考文獻(xiàn)
第三章 數(shù)據(jù)儲(chǔ)存與分析系統(tǒng)
第一節(jié) 數(shù)據(jù)儲(chǔ)存
第二節(jié) 數(shù)據(jù)分析
一、 常用術(shù)語
二、 流式圖譜的表現(xiàn)形式
三、 熒光補(bǔ)償
第三節(jié) 數(shù)據(jù)分析實(shí)例
實(shí)例一： 雙參數(shù)FSC/SSC分析
實(shí)例二： 三參數(shù)FSC/SSC/FL1分析
實(shí)例三： 四參數(shù)FSC/SSC/FL1/FL2簡單樣本分析
實(shí)例四： 四參數(shù)FSC/SSC/FL1/FL2復(fù)雜樣本分析
小結(jié)
參考文獻(xiàn)
第四章 細(xì)胞分選
第一節(jié) 細(xì)胞分選的原理
一、 液滴形成
二、 延遲時(shí)間
三、 液滴充電與偏轉(zhuǎn)
四、 液滴的收集
第二節(jié) 影響分選的因素
一、 分選速度
二、 分選門的設(shè)定
三、 分選模式
第三節(jié) 分選的質(zhì)量控制與評價(jià)
一、 分選的準(zhǔn)確性
二、 分選的效率
三、 無菌分選
四、 分選對細(xì)胞活性的影響
第四節(jié) 分選前的準(zhǔn)備
一、 分選用細(xì)胞的制備要求
二、 準(zhǔn)備的材料
三、 分選時(shí)需要考慮的幾個(gè)問題
第五節(jié) 細(xì)胞分選的應(yīng)用實(shí)例
實(shí)例一： 單細(xì)胞分選
實(shí)例二： 回收極低比例（<0.01%）的細(xì)胞
實(shí)例三： 純化穩(wěn)定的細(xì)胞系
實(shí)例四： 淋巴細(xì)胞分選
實(shí)例五： 組織特異性干細(xì)胞分選
實(shí)例六： 染料排異性干細(xì)胞分選
實(shí)例七： 精子分選
小結(jié)
參考文獻(xiàn)
第五章 細(xì)胞表面標(biāo)志的檢測
第一節(jié) 血液細(xì)胞的檢測
第二節(jié) 細(xì)胞表面標(biāo)志的染色技術(shù)
一、 細(xì)胞表面分化抗原
二、 直接染色法和間接染色法
第三節(jié) 對照的設(shè)置
一、 陰性對照
二、 同型對照
三、 陽性對照
四、 熒光補(bǔ)償
第四節(jié) 定量測定
一、 外標(biāo)法
二、 內(nèi)標(biāo)法
三、 標(biāo)準(zhǔn)曲線法
四、 分辨率
第五節(jié) 設(shè)門的策略
一、 設(shè)門
二、 檢驗(yàn)門
三、 熒光設(shè)門
四、 多色流式分析實(shí)例
小結(jié)
參考文獻(xiàn)
第六章 細(xì)胞內(nèi)成分的檢測
第一節(jié) 流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞內(nèi)蛋白的特點(diǎn)
第二節(jié) 細(xì)胞內(nèi)蛋白染色通則
一、 細(xì)胞內(nèi)蛋白染色的步驟
二、 細(xì)胞內(nèi)蛋白染色應(yīng)遵循的原則
第三節(jié) 磷酸化蛋白的檢測
一、 固定和通透細(xì)胞
二、 熒光抗體染色
三、 優(yōu)化染色方法
四、 多種磷酸化蛋白同時(shí)檢測
第四節(jié) 細(xì)胞因子的檢測
一、 T淋巴細(xì)胞的細(xì)胞因子檢測
二、 單核細(xì)胞的細(xì)胞因子檢測
三、 細(xì)胞內(nèi)蛋白檢測的優(yōu)缺點(diǎn)
第五節(jié) 微球免疫測定法
一、 CBA方法的原理
二、 CBA方法的流程
三、 CBA方法的檢測范圍
四、 CBA方法的優(yōu)缺點(diǎn)
第六節(jié) 磷酸化蛋白與DNA同時(shí)檢測
小結(jié)
參考文獻(xiàn)
第七章 細(xì)胞核成分的檢測
第一節(jié) 常用的DNA染料
第二節(jié) 細(xì)胞周期
一、 細(xì)胞周期的定量分析方法
二、 粘連細(xì)胞的分析
三、 畫門方法
四、 BrdU/PI雙參數(shù)分析細(xì)胞周期
第三節(jié) 細(xì)胞周期的動(dòng)態(tài)分析
一、 BrdU/PI雙參數(shù)檢測
二、 Hoechst/PI雙參數(shù)檢測
第四節(jié) DNA總量分析和倍體分析
一、 DNA總量分析
二、 正常生物體的倍體分析
三、 腫瘤細(xì)胞的非整倍體分析
四、 植物倍體的分析
第五節(jié) 細(xì)胞同步化
一、 自然同步化
二、 人工同步化
第六節(jié) DNA與RNA同時(shí)檢測
一、 吖啶橙（AO）同時(shí)檢測DNA與RNA
二、 Hoechst 33342/Pyronin Y同時(shí)檢測DNA和RNA
第七節(jié) DNA與蛋白質(zhì)同時(shí)檢測
一、 DNA和總蛋白同時(shí)檢測
二、 DNA和細(xì)胞周期蛋白同時(shí)檢測
第八節(jié) 染色體分析
小結(jié)
參考文獻(xiàn)
第八章 細(xì)胞增殖與死亡的檢測
第一節(jié) 細(xì)胞增殖的檢測
第二節(jié) 細(xì)胞凋亡的檢測
一、 散射光的檢測
二、 caspases酶檢測
三、 線粒體膜電位的檢測
四、 質(zhì)膜的檢測
五、 DNA檢測
六、 細(xì)胞衰老與端粒測定
第三節(jié) 壞死細(xì)胞的檢測
一、 散射光的檢測
二、 膜通透性的檢測
第四節(jié) 細(xì)胞凋亡、死亡檢測中存在的問題
一、 細(xì)胞凋亡的頻率可能與細(xì)胞死亡的發(fā)生率無關(guān)
二、 以DNA片段來估計(jì)細(xì)胞凋亡頻率的困難
三、 將凋亡小體或核碎片誤判為凋亡細(xì)胞
四、 細(xì)胞凋亡、細(xì)胞壞死、細(xì)胞凋亡的"壞死階段"
五、 樣品制備過程中凋亡細(xì)胞的選擇性丟失
六、 吞噬凋亡小體的活細(xì)胞偽裝成凋亡細(xì)胞
七、 商業(yè)試劑/試劑盒存在的問題
八、 細(xì)胞形態(tài)仍然是鑒定凋亡細(xì)胞的黃金標(biāo)準(zhǔn)
小結(jié)
參考文獻(xiàn)
第九章 流式細(xì)胞術(shù)的應(yīng)用概述
第一節(jié) 流式細(xì)胞術(shù)在生物學(xué)研究中的應(yīng)用
一、 在細(xì)胞生物學(xué)中的應(yīng)用
二、 在細(xì)胞周期研究和DNA倍體分析中的應(yīng)用
三、 在細(xì)胞凋亡分析中的應(yīng)用
四、 在染色體核型分析中的應(yīng)用
五、 在分子遺傳學(xué)中的應(yīng)用
六、 在免疫學(xué)中的應(yīng)用　
七、 在植物學(xué)中的應(yīng)用
第二節(jié) 流式細(xì)胞術(shù)在醫(yī)學(xué)研究及臨床中的應(yīng)用
一、 在腫瘤學(xué)中的應(yīng)用
二、 在臨床細(xì)胞免疫學(xué)中的應(yīng)用
三、 在血液病治療中的應(yīng)用
四、 在血栓與出血性疾病治療中的應(yīng)用
五、 生物學(xué)領(lǐng)域的其他應(yīng)用
第三節(jié) 流式細(xì)胞術(shù)在農(nóng)林畜牧養(yǎng)殖業(yè)中的應(yīng)用
一、 在植物學(xué)中的應(yīng)用
二、 在家畜性別控制中的應(yīng)用
三、 在家畜疾病監(jiān)控與預(yù)防中的應(yīng)用
第四節(jié) 流式細(xì)胞術(shù)在微生物學(xué)中的應(yīng)用
一、 在病原微生物研究中的應(yīng)用
二、 在環(huán)境微生物研究中的應(yīng)用
第五節(jié) 流式細(xì)胞術(shù)在食品、藥品檢測方面的應(yīng)用
一、 在食品檢測中的應(yīng)用
二、 在藥品檢測中的應(yīng)用
第六節(jié) 流式細(xì)胞術(shù)新技術(shù)的應(yīng)用
一、 CBA方法
二、 定量流式細(xì)胞術(shù)
小結(jié)
參考文獻(xiàn)
第十章 樣本制備和染色方法
第一節(jié) 單細(xì)胞懸液的制備
一、 小鼠末梢血的采集和單細(xì)胞懸液的制備
二、 小鼠胸腺的分離和單細(xì)胞懸液的制備
三、 小鼠骨髓的采集和單細(xì)胞懸液的制備
四、 密度梯度離心法制備外周血單個(gè)核細(xì)胞懸液
五、 小鼠脾臟的分離和單細(xì)胞懸液的制備
六、 小鼠成體乳腺單細(xì)胞懸液的制備
七、 小鼠胰腺細(xì)胞懸液的制備
第二節(jié) 熒光素標(biāo)記抗體的制備
一、 FITC/ Texas Red 標(biāo)記
二、 生物素標(biāo)記
三、 Allophycocyanin（APC）或者Phycoerythrin（PE）標(biāo)記
第三節(jié) 分析和分選用的細(xì)胞染色
一、 流式分析用的細(xì)胞染色方法
二、 流式分選用的細(xì)胞染色方法
三、 SP細(xì)胞的染色方法
四、 流式分選用的精子染色方法
第四節(jié) 細(xì)胞內(nèi)分子染色
一、 常用的細(xì)胞固定方法
二、 細(xì)胞內(nèi)分子的染色方法
三、 細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞外分子同時(shí)染色的方法
第五節(jié) 細(xì)胞周期染色
一、 固定全細(xì)胞的PI染色方法
二、 非固定細(xì)胞的無洗染色方法
三、 BrdU染色方法
四、 植物細(xì)胞的DNA染色方法
第六節(jié) 細(xì)胞同步化實(shí)驗(yàn)方法
一、 過剩胸腺嘧啶脫氧核苷法--S期細(xì)胞同步化
二、 羥基脲法--S期細(xì)胞同步化
三、 秋水仙胺法--M期細(xì)胞同步化
四、 血清饑餓法--G0期細(xì)胞同步化
五、 G1期和G2期細(xì)胞同步化實(shí)驗(yàn)方法
第七節(jié) DNA和RNA同時(shí)染色
一、 Hoechst 33342/PY同時(shí)檢測DNA和RNA
二、 吖啶橙（AO）同時(shí)檢測DNA和RNA
第八節(jié) 細(xì)胞凋亡染色
一、 PI染色法--DNA凋亡峰的檢測
二、 Annexin V/PI雙染色法
三、 Hoechst 33342/PI雙染色法
四、 TUNEL染色法
小結(jié)
參考文獻(xiàn)
附錄
一、 流式細(xì)胞術(shù)相關(guān)網(wǎng)址
二、 流式細(xì)胞術(shù)相關(guān)實(shí)驗(yàn)方法網(wǎng)址
三、 熒光素試劑公司
四、 熒光光譜網(wǎng)址
五、 熒光素激發(fā)和發(fā)射光譜一覽表