微生物生物技術(shù)——細菌系統(tǒng)實驗指南
定 價：118 元
叢書名：生命科學(xué)實驗指南系列
- 作者：(印)S. 待仕，(印)H.R. 達什主編
- 出版時間：2018/12/1
- ISBN：9787030576569
- 出 版 社：科學(xué)出版社
- 中圖法分類：TQ92-33
- 頁碼：260
- 紙張：
- 版次：31
- 開本：16
細菌是生命科學(xué)研究，特別是生物技術(shù)及其產(chǎn)業(yè)研發(fā)的重要材料。本指南介紹了微生物生物技術(shù)系列實驗原理、反應(yīng)試劑的作用、操作步驟、操作流程、操作要點，以及如何觀察實驗結(jié)果、如何記錄結(jié)果和對結(jié)果進行分析對比、實驗中出現(xiàn)問題的原因和解決問題的方法及注意事項，將復(fù)雜的生物技術(shù)研究方法，通俗易懂地介紹給讀者，便于本科生、碩士研究生、博士研究生、科學(xué)工作者和技術(shù)人員理解和建立成功的信心。內(nèi)容涉及細菌基礎(chǔ)分子微生物學(xué)、克隆和轉(zhuǎn)化、先進的分子微生物學(xué)、分子微生物學(xué)計算機輔助研究和分子微生物學(xué)的應(yīng)用。本書既有常規(guī)的生物技術(shù)實驗，也融入了先進生物技術(shù)實驗；既有理論研究實驗，又有應(yīng)用型研究實驗。
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目錄
第1章 細菌分子微生物學(xué)基礎(chǔ) 1
實驗1.1 基因組DNA的分離 1
導(dǎo)言 1
原理 1
所需試劑及其作用 2
操作步驟 3
觀察 4
結(jié)果表格 4
疑難問題和解決方案 4
注意事項 5
操作流程 5
實驗1.2 細菌裂解物的制備 6
導(dǎo)言 6
原理 7
操作步驟 8
觀察 9
結(jié)果表格 10
疑難問題和解決方案 10
注意事項 10
操作流程 11
實驗1.3 質(zhì)粒的分離 13
導(dǎo)言 13
原理 14
所需試劑及其作用 15
操作步驟 16
觀察 17
結(jié)果表格 17
疑難問題和解決方案 17
注意事項 17
操作流程 18
實驗1.4 細菌總RNA的分離 19
導(dǎo)言 19
原理 19
所需試劑及其作用 20
操作步驟 21
觀察 22
結(jié)果表格 22
疑難問題和解決方案 23
注意事項 23
操作流程 23
實驗1.5 16S rRNA基因的擴增 24
導(dǎo)言 24
原理 26
所需試劑及其作用 27
操作步驟 28
觀察 30
疑難問題和解決方案 30
注意事項 30
操作流程 31
實驗1.6 瓊脂糖凝膠電泳 31
導(dǎo)言 31
原理 32
所需試劑及其作用 33
操作步驟 35
觀察 36
疑難問題和解決方案 37
注意事項 37
操作流程 37
第2章 克隆與轉(zhuǎn)化 39
實驗2.1 感受態(tài)細胞制備和熱激轉(zhuǎn)化 39
導(dǎo)言 39
原理 40
所需試劑及其作用 41
操作步驟 41
觀察 43
疑難問題和解決方案 43
注意事項 43
操作流程 44
實驗2.2 電穿孔 45
導(dǎo)言 45
原理 46
所需試劑及其作用 47
操作步驟 48
觀察 49
結(jié)果表格 49
疑難問題和解決方案 49
注意事項 50
操作流程 50
實驗2.3 限制性內(nèi)切核酸酶消化和連接 51
導(dǎo)言 51
原理 51
所需試劑及其作用 55
操作步驟 56
觀察 57
疑難問題和解決方案 58
注意事項 58
操作流程 58
實驗2.4 克隆所需合適載體系統(tǒng)的選擇 59
導(dǎo)言 59
克隆載體的不同類型 62
選擇合適克隆載體的標(biāo)準(zhǔn) 66
結(jié)論 68
實驗2.5 藍-白斑篩選驗證轉(zhuǎn)化 69
導(dǎo)言 69
原理 69
所需試劑及其作用 70
操作步驟 71
觀察 72
疑難問題和解決方案 72
注意事項 73
操作流程 73
實驗2.6 PCR驗證克隆 74
導(dǎo)言 74
原理 74
所需試劑及其作用 76
操作步驟 77
觀察 78
疑難問題和解決方案 78
注意事項 78
操作流程 79
第3章 分子微生物學(xué)先進技術(shù) 80
實驗3.1 cDNA的合成 80
導(dǎo)言 80
原理 80
所需試劑及其作用 82
操作步驟 83
觀察 85
疑難問題和解決方案 85
注意事項 85
操作流程 86
實驗3.2 qRT-PCR分析基因表達 86
導(dǎo)言 86
原理 87
所需試劑及其作用 89
操作步驟 90
疑難問題和解決方案 92
注意事項 93
操作流程 93
實驗3.3 用報道基因方法進行基因表達分析 93
導(dǎo)言 94
原理 94
所需試劑及其作用 95
操作步驟 96
觀察 97
疑難問題和解決方案 97
注意事項 97
操作流程 97
實驗3.4 基因表達半定量分析 98
導(dǎo)言 98
原理 99
所需試劑及其作用 100
操作步驟 101
觀察 103
觀察表格 103
疑難問題和解決方案 104
注意事項 104
操作流程 105
實驗3.5 Northern印跡 105
導(dǎo)言 105
原理 106
所需試劑及其作用 108
操作步驟 109
觀察 111
疑難問題和解決方案 111
注意事項 111
操作流程 111
實驗3.6 宏基因組DNA的分離 113
導(dǎo)言 113
原理 113
所需試劑及其作用 115
操作步驟 116
觀察 116
結(jié)果表格 117
疑難問題和解決方案 117
注意事項 117
操作流程 117
實驗3.7 細菌細胞質(zhì)粒消除 118
導(dǎo)言 118
原理 119
所需試劑及其作用 120
操作步驟 121
觀察 121
結(jié)果表格 121
疑難問題和解決方案 121
注意事項 121
操作流程 122
實驗3.8 細菌接合 122
導(dǎo)言 122
原理 123
所需試劑及其作用 124
操作步驟 125
觀察 125
結(jié)果表格 126
疑難問題和解決方案 126
注意事項 126
操作流程 126
實驗3.9 細菌轉(zhuǎn)導(dǎo) 127
導(dǎo)言 127
原理 128
所需試劑及其作用 129
操作步驟 130
觀察 131
結(jié)果表格 131
疑難問題和解決方案 131
注意事項 131
操作流程 131
第4章 分子微生物多樣性 133
實驗4.1 質(zhì)粒圖譜分析 133
導(dǎo)言 133
原理 133
所需試劑及其作用 134
操作步驟 136
觀察 139
結(jié)果表格 139
疑難問題和解決方案 140
注意事項 140
操作流程 140
實驗4.2 擴增核糖體DNA限制性分析研究細菌相關(guān)性 142
導(dǎo)言 142
原理 142
所需試劑及其作用 143
操作步驟 145
觀察 149
結(jié)果表格 149
疑難問題和解決方案 150
注意事項 150
操作流程 150
實驗4.3 變性梯度凝膠電泳(DGGE)分析對宏基因組細菌多態(tài)性研究 152
導(dǎo)言 152
原理 152
所需試劑及其作用 153
操作步驟 154
觀察 158
結(jié)果表格 158
疑難問題和解決方案 158
操作流程 159
實驗4.4 脈沖場凝膠電泳(PFGE)分析 159
導(dǎo)言 160
原理 161
所需試劑及其作用 162
操作步驟 163
觀察 165
結(jié)果表格 165
疑難問題和解決方案 165
注意事項 166
操作流程 166
實驗4.5 細菌多重PCR快速檢測 168
導(dǎo)言 168
原理 169
所需試劑及其作用 169
操作步驟 171
觀察 171
結(jié)果表格 171
疑難問題和解決方案 172
注意事項 172
操作流程 172
實驗4.6 腸桿菌基因間重復(fù)共有序列和細菌基因外重復(fù)回文序列PCR技術(shù) 173
導(dǎo)言 173
原理 174
所需試劑及其作用 175
操作步驟 177
觀察 179
結(jié)果表格 179
疑難問題和解決方案 179
注意事項 180
操作流程 180
第5章 分子微生物學(xué)計算機輔助研究 181
實驗5.1 基因序列分析 181
導(dǎo)言 181
樣品序列分析工具 181
原理 181
操作步驟 182
操作流程 187
實驗5.2 基因庫序列的遞交 188
導(dǎo)言 188
原理 188
操作步驟 189
操作流程 194
實驗5.3 系統(tǒng)發(fā)育樹 194
導(dǎo)言 194
解讀樹 195
系統(tǒng)發(fā)育樹軟件 195
原理 195
操作步驟 197
操作流程 201
實驗5.4 引物設(shè)計 201
導(dǎo)言 201
用軟件設(shè)計引物 202
引物設(shè)計指南 203
使用NetPrimer軟件設(shè)計引物程序 203
操作流程 206
第6章 分子微生物學(xué)的應(yīng)用 207
實驗6.1 細菌生物膜在玻璃管中的形成 207
導(dǎo)言 207
原理 208
所需試劑及其作用 209
操作步驟 209
觀察 209
結(jié)果表格 210
疑難問題和解決方案 210
注意事項 211
操作流程 211
實驗6.2 微孔板中細菌生物膜形成的篩選 212
導(dǎo)言 212
原理 213
所需試劑及其作用 213
操作步驟 214
觀察 214
結(jié)果表格 214
疑難問題和解決方法 215
注意事項 215
操作流程 216
實驗6.3 生物膜共聚焦激光掃描顯微鏡分析 217
導(dǎo)言 217
原理 218
所需試劑及其作用 219
操作步驟 220
觀察 221
結(jié)果表格 221
注意事項 222
疑難問題和解決方案 222
操作流程 222
實驗6.4 細菌生物膜熒光顯微鏡和圖像分析 223
導(dǎo)言 223
原理 223
所需試劑及其作用 224
操作步驟 225
結(jié)果表格 228
注意事項 228
操作流程 228
實驗6.5 生物表面活性劑的篩選 229
導(dǎo)言 229
原理 230
所需試劑及其作用 231
操作步驟 231
觀察 232
結(jié)果表格 232
操作流程 232
實驗6.6 多環(huán)芳烴細菌生物治理的光譜光度分析 233
導(dǎo)言 233
原理 233
所需試劑及其作用 234
操作步驟 235
觀察 235
結(jié)果表格 236
注意事項 236
操作流程 236
實驗6.7 篩選金屬富集細菌的硫化氫實驗 237
導(dǎo)言 237
原理 237
所需試劑及其作用 238
操作步驟 239
觀察 239
結(jié)果表格 240
疑難問題和解決方案 240
注意事項 240
操作流程 240
參考文獻 242
進一步讀物 243
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