本書較系統(tǒng)地介紹了生物工程下游技術領域所涉及的主要技術手段的原理、操作方法和操作規(guī)范。主要包括細胞破碎與固液分離技術、膜分離技術、層析技術和電泳技術以及相關領域常見的儀器設備及其操作方法。在此基礎上介紹了22項生物工程下游常規(guī)實驗和4項綜合性實驗。
本書實驗項目主要為適應高等院校生物工程、生物技術及食品衛(wèi)生專業(yè)本科實踐教學的需要而選擇和設計，同時也適用于相關學科的職業(yè)技術教育。本書還可供相關專業(yè)的研究生及科研人員查閱參考。
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本書介紹生物工程下游技術的主要技術手段，其原理、操作過程以及在大規(guī)模生產(chǎn)過程中的應用方式，重點闡述生物物質分離技術的要點、過程和實驗技能。書中對生物工程下游領域所涉及的重要實驗手段均以簡單學生實驗的方式編著。
目錄
前言
第一部分 生物工程下游技術實驗基礎理論
1 生物工程下游技術概述 3
1.1 生物工程下游技術操作的對象 3
1.2 物質分離純化的基本策略 4
1.3 生物工程下游分離基本過程 6
2 細胞破碎與固液分離技術 12
2.1 細胞破碎技術 12
2.2 固液分離技術 15
2.3 離心分離技術 16
3 膜分離技術 23
3.1 透析 23
3.2 超濾技術 25
3.3 微孔膜過濾技術 26
4 層析技術 28
4.1 層析的基本概念 28
4.2 層析法的分類 31
4.3 柱層析的基本操作 32
4.4 凝膠層析 34
4.5 離子交換層析 42
4.6 親和層析 48
5 電泳分離技術 55
5.1 電泳基本原理 55
5.2 電泳的分類 58
第二部分 生物工程下游技術學生實驗
第一章 生物工程下游技術常見儀器設備的使用 63
實驗一 管式離心機在發(fā)酵菌液分離中的應用 63
實驗二 連續(xù)流超高壓冷凍細胞破碎機在生物工程中的應用 64
實驗三 板框壓濾機在發(fā)酵菌液分離中的應用 67
實驗四 陶瓷微濾膜在發(fā)酵菌液濃縮中的應用 69
實驗五 超濾膜在蛋白質濃縮中的應用 71
實驗六 蛋白質的真空濃縮 72
實驗七 真空冷凍干燥機在生物制品生產(chǎn)中的應用 74
實驗八 蛋白質的冷凍干燥 76
實驗九 噴霧干燥機在生物制品中的應用 78
第二章 細胞破碎與粗分離實驗 81
實驗一 酵母細胞的破碎及破碎率的測定 81
實驗二 機械剪切法細胞破碎實驗 82
實驗三 硫酸銨分級鹽析分離血清中的主要蛋白質 84
實驗四 蔗糖密度梯度離心分離實驗 87
實驗五 青霉素的萃取與萃取率的計算 88
實驗六 蛋白質的透析 90
實驗七 胰凝乳蛋白酶的制備 91
實驗八 牛奶中酪蛋白和乳蛋白素粗品的制備 93
第三章 層析和電泳分離分析技術實驗 95
實驗一 凝膠層析法測定蛋白質分子質量 95
實驗二 親和層析純化胰蛋白酶 98
實驗三 離子交換色譜分離氨基酸 106
實驗四 SDS-PAGE測定蛋白質分子質量 108
實驗五 血清脂蛋白瓊脂糖凝膠電泳 111
第四章 綜合性設計性實驗 114
實驗一 血清γ-球蛋白的分離純化與鑒定 114
實驗二 溶菌酶的制備及其性質 118
實驗三 超氧化物歧化酶SOD的分離純化技術 122
實驗四 糖化酶的固定化及其在葡萄糖生產(chǎn)中的應用工藝 129
第三部分 附錄
附錄一 生物工程下游技術實驗室的安全及環(huán)保知識 137
附錄二 常用消毒劑使用方法 146
附錄三 常見的消毒劑配制表 148
附錄四 常用pH緩沖溶液 149
附錄五 一些常用酸堿指示劑 158
附錄六 常用固態(tài)化合物當量濃度配制參考表 159
附錄七 化學試劑純度分級表 160
附錄八 調整硫酸銨溶液飽和度計算表(0℃) 161
附錄九 調整硫酸銨溶液飽和度計算表(25℃) 162
附錄十 不同溫度下飽和硫酸銨溶液的數(shù)據(jù) 163
附錄十一 常見蛋白質分子質量參考表 164
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