《生物技術(shù)綜合實驗(生命科學核心課程系列教材)》(作者曹軍衛(wèi))包括基因工程、蛋白質(zhì)工程、細胞工程、發(fā)酵工程、免疫學方面最新的、應(yīng)用最廣泛的實驗技術(shù)，共65個相關(guān)實驗。各實驗的組織結(jié)構(gòu)均包括實驗?zāi)康摹嶒炘�、器材、操作步驟、結(jié)果及思考題，并加強了各實驗的安全提示。本書力求能夠體現(xiàn)目前最新的技術(shù)方法，并且語言簡潔、流暢，條理性和可操作性強。
《生物技術(shù)綜合實驗(生命科學核心課程系列教材)》適合作為微生物學、微生物工程、生物工程、 生物技術(shù)、發(fā)酵工程、 食品、生物醫(yī)學工程等相關(guān)專業(yè)的生物技術(shù)綜合實驗教學用書，也可用于生物、醫(yī)學和農(nóng)學類應(yīng)用性學科的相關(guān)專業(yè)實驗課程教 學。
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生物技術(shù)專業(yè)以往使用的實驗講義不利于學生的學習與參考。因此，編者組織武漢大學知名教授與武漢東湖學院生物技術(shù)專業(yè)教師共同編寫生物技術(shù)綜合實驗教材，希望借此為實現(xiàn)本專業(yè)人才培養(yǎng)目標做出貢獻。這是國內(nèi)第一部由211、985工程大學與民營大學合作出版的本科生專業(yè)課程教材，將會對全國各類大學的生物技術(shù)綜合實驗課程有一定的參考價值。 《生物技術(shù)綜合實驗(生命科學核心課程系列教材)》(作者曹軍衛(wèi))包括基因工程、蛋白質(zhì)工程、細胞工程、發(fā)酵工程、免疫學方面的最新的、應(yīng)用最廣泛的實驗技術(shù)，共有65個相關(guān)實驗。編者希望借此實驗教材的編寫，帶動該實驗課程乃至整個專業(yè)的建設(shè)與改革。
目 錄
前言
第1篇 基因工程
第1章 基因工程常用技術(shù) 2
實驗1染色體DNA的制備——植物總DNA的提取 3
實驗2細菌總DNA的提取 5
實驗3動物組織DNA的提取 7
實驗4質(zhì)粒DNA的提取 8
實驗5瓊脂糖凝膠電泳分離檢測DNA 12
實驗6 PCR擴增目的基兇 15
實驗7瓊脂糖凝膠中I）NA片段的回收 19
實驗8 D}JA的酶切 22
實驗9感受態(tài)細胞的制備 26
實驗10在質(zhì)粒載體巾進行外源DNA的克隆 29
實驗11質(zhì)粒DNA的轉(zhuǎn)化 31
實驗12基兇定位 34
實驗13基岡的定點突變 37
實驗14 DNA的隨機突變 40
第2章 原核表達體系的應(yīng)用 43
實驗15原核生物巾外源基兇的表達和純化 43
實驗16宏基岡組文庫構(gòu)建 47
實驗17 cDNA文庫的構(gòu)建 52
第3章 真核表達體系的應(yīng)用 66
實驗18小鼠p actin基兇的克隆與表達 66
實驗19酵母表達體系及酵母雙雜交技術(shù) 76
實驗20植物表達體系 84
第2篇 蛋白質(zhì)工程
第4章 蛋白質(zhì)工程常用技術(shù) 95
實驗21蛋白質(zhì)末端分析 95
賓驗22 SDS_PA(;E電泳分離檢測蛋白質(zhì) 100
實驗23離子交換層析純化牛奶巾的酪蛋白 106
實驗24凝膠過濾 115
實驗25親和層析 124
實驗26高效液相色譜法測定牛乳中乳白蛋白 127
實驗27氣相色譜法測定人白蛋白制品巾辛酸鈉含量 135
實驗28蛋白質(zhì)二維凝膠電泳技術(shù) 139
實驗29免疫印跡 149
第3篇 細胞工程
第5章 細胞工程技術(shù) 156
實驗30菊花的愈傷組織誘導培養(yǎng) 156
實驗31菊花愈傷組織的分化培養(yǎng) 165
實驗32菊化苗的生根培養(yǎng) 168
實驗33植物原生質(zhì)體分離與融合 169
實驗34動物細胞的原代培養(yǎng) 176
實驗35動物細胞的傳代培養(yǎng) 182
實驗36培養(yǎng)細胞的增殖及活力檢測 183
實驗37流式細胞儀檢測技術(shù) 187
第4篇 發(fā)酵工程
第6章 固體培養(yǎng)技術(shù) 192
實驗38平菇的同體培養(yǎng)技術(shù) 192
第7章 厭氧發(fā)酵技術(shù) 197
實驗39啤酒發(fā)酵技術(shù) 197
實驗40酸奶發(fā)酵 205
第8章 好氧分批發(fā)酵技術(shù) 213
實驗41單細胞蛋白好氧分批發(fā)酵技術(shù) 213
第9章 連續(xù)發(fā)酵技術(shù) 222
實驗42酵母的連續(xù)發(fā)酵技術(shù) 222
第10章 動植物細胞懸浮培養(yǎng)技術(shù) 229
實驗43動物細胞懸浮培養(yǎng) 229
實驗44植物細胞懸浮培養(yǎng) 237
實驗45共聚焦顯微技術(shù) 239
第5篇 免 瘦 學
第11章 免疫學技術(shù) 246
實驗46環(huán)狀沉淀反應(yīng) 246
實驗47單向瓊脂擴散實驗 247
實驗48雙向瓊脂擴散實驗 249
實驗49對流免疫電泳實驗 250
實驗50火箭電泳實驗 252
實驗51酶聯(lián)免疫吸附測定(EI ISA) 253
實驗52 BA_ELISA 255
實驗53抗原和免疫血清的制備 257
實驗54動物細胞免疫熒光技術(shù) 259
實驗55淋巴細胞雜交瘤單克隆抗體技術(shù) 261
實驗56鹽析法純化免疫球蛋白 265
實驗57 DEAE_Sephadex A_50柱層析純化免疫球蛋白 268
實驗58 Sepharose CL 4B親和柱層析純化IgG及IgG亞類 270
實驗59高效液相色譜法純化小鼠腹水中單克隆抗體 272
實驗60單克隆抗體親和層析柱純化重組人a2a干擾素 273
實驗61免疫球蛋白酶標記抗體技術(shù) 274
實驗62熒光素標記抗體技術(shù) 276
實驗63免疫斑點實驗 279
實驗64免疫組化染色技術(shù)檢測淋巴細胞表面標記 281
實驗65免疫共沉淀實驗 285
參考文獻 289
附錄1常用緩沖溶液的配制 291
附錄2常用培養(yǎng)基的配制 297
附錄3不同溫度下硫酸銨飽和度計算表 305
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