《生物化學(xué)實驗技術(shù)教程》是編者在多年生物化學(xué)實驗教學(xué)基礎(chǔ)上,反復(fù)摸索,以專題模塊的形式編寫而成。本書第一篇介紹了實驗技術(shù)原理,包括離心技術(shù)、層析技術(shù)、電泳技術(shù)、光譜技術(shù)和生物大分子的分離純化。第二篇包括糖化學(xué)實驗技術(shù)、脂質(zhì)化學(xué)實驗技術(shù)、蛋白質(zhì)化學(xué)實驗技術(shù)、核酸化學(xué)實驗技術(shù)、酶學(xué)及維生素實驗技術(shù)、物質(zhì)代謝實驗技術(shù)、常見生物活性物質(zhì)分離分析技術(shù)、分子生物學(xué)基礎(chǔ)實驗技術(shù)、設(shè)計性實驗選題和實驗論文撰寫10個模塊,共82項實驗和20項選題。既有基礎(chǔ)實驗,又有綜合性實驗和設(shè)計性實驗。附錄介紹了常用試劑的配制與標定、常用酸堿指示劑以及市售酸堿試劑的介紹等!渡锘瘜W(xué)實驗技術(shù)教程》內(nèi)容系統(tǒng)、全面,有一定的深度和廣度,可操作性強,重視能力培養(yǎng),適用于師范院校、農(nóng)林院校及綜合性大學(xué)相關(guān)專業(yè)本科學(xué)生生物化學(xué)實驗教學(xué),也可作為相關(guān)教學(xué)和科研人員的參考書。全書由曾富華審查、統(tǒng)編和定稿。
《生物化學(xué)實驗技術(shù)教程》第一篇介紹了實驗技術(shù)原理,包括離心技術(shù)、層析技術(shù)、電泳技術(shù)、光譜技術(shù)和生物大分子的分離純化。第二篇包括糖化學(xué)實驗技術(shù)、脂質(zhì)化學(xué)實驗技術(shù)、蛋白質(zhì)化學(xué)實驗技術(shù)、核酸化學(xué)實驗技術(shù)、酶學(xué)及維生素實驗技術(shù)、物質(zhì)代謝實驗技術(shù)、常見生物活性物質(zhì)分離分析技術(shù)、分子生物學(xué)基礎(chǔ)實驗技術(shù)、設(shè)計性實驗選題和實驗論文撰寫10個模塊,共82項實驗和20項選題。既有基礎(chǔ)實驗,又有綜合性實驗和設(shè)計性實驗。附錄介紹了常用試劑的配制與標定、常用酸堿指示劑以及市售酸堿試劑的介紹等。全書由曾富華審查、統(tǒng)編和定稿。
第一篇 生物化學(xué)實驗技術(shù)原理第一章 離心技術(shù)及原理 1.1 離心基本原理 1.2 離心機的結(jié)構(gòu)與分類 1.3 離心機的應(yīng)用第二章 層析技術(shù)及原理 2.1 層析概 第一篇 生物化學(xué)實驗技術(shù)原理第一章 離心技術(shù)及原理 1.1 離心基本原理 1.2 離心機的結(jié)構(gòu)與分類 1.3 離心機的應(yīng)用第二章 層析技術(shù)及原理 2.1 層析概述 2.2 常用層析技術(shù)第三章 電泳技術(shù)及原理 3.1 電泳概述 3.2 常用電泳技術(shù)第四章 光譜技術(shù)及原理 4.1 分光光度法 4.2 旋光分析法第五章 生物大分子的分離純化 5.1 分離純化概述 5.2 生物材料的選擇和前處理 5.3 常用生物大分子分離純化技術(shù) 5.4 樣品的保存第二篇 生物化學(xué)模塊實驗第一模 塊糖化學(xué)實驗技術(shù) 1.1 糖化學(xué)實驗技術(shù) 實驗1 糖的還原作用 實驗2 糖的旋光性和變旋現(xiàn)象(糖含量測定) 1.2 糖的含量測定 實驗1 血糖濃度的測定(鄰甲苯胺法) 實驗2 蒽酮比色法測定植物組織中總糖含量 實驗3 3,5-二硝基水楊酸法測定總糖與還原糖含量第二模塊 脂質(zhì)化學(xué)實驗技術(shù) 2.1 脂肪提取及含量和性質(zhì)測定 實驗1 脂肪酸價的測定 實驗2 油脂皂化值的測定 實驗3 粗脂肪提取與含量的測定(索氏抽提法) 實驗4 血清甘油三酯含量測定(乙酰丙酮顯色法) 2.2 血清膽固醇的定量測定 實驗1 磷硫鐵法測定血清膽固醇含量 實驗2 鄰苯二甲醛法測定血清膽固醇含量 實驗3 乙酸酐法測定血清膽固醇含量 2.3 肝中丙二醛含量的測定第三模塊 蛋白質(zhì)化學(xué)實驗技術(shù) 3.1 蛋白質(zhì)與氨基酸的性質(zhì)實驗 實驗1 蛋白質(zhì)的顏色反應(yīng) 實驗2 蛋白質(zhì)的沉淀作用 實驗3 蛋白質(zhì)的鹽析和透析 3.2 牛乳中酪蛋白的制備 3.3 蛋白質(zhì)和氨基酸的層析分離 實驗1 氨基酸紙層析 實驗2 氨基酸的薄層層析 實驗3 離子交換層析分離蛋白質(zhì) 實驗4 凝膠過濾層析測定蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量 3.4 蛋白質(zhì)和氨基酸含量測定 實驗1 植物組織中賴氨酸含量的測定 實驗2 考馬斯亮藍(G-250)比色法測定蛋白質(zhì)含量 實驗3 Folin-酚法測定蛋白質(zhì)含量 實驗4 紫外分光光度法測定蛋白質(zhì)含量 實驗5 微量凱氏定氮法測定蛋白質(zhì)含量 3.5 蛋白質(zhì)電泳分析 實驗1 乙酸纖維薄膜電泳分離血清蛋白 實驗2 聚丙烯酰胺凝膠盤狀電泳分離血清蛋白質(zhì) 實驗3 SDS-PAGE測定蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量 實驗4 等電聚焦電泳法測定蛋白質(zhì)的等電點 實驗5 SDS-PAGE檢測植物中熱激蛋白(銀染法)第四模塊 核酸化學(xué)實驗技術(shù) 4.1 核苷酸的分析測定 實驗1 紙電泳法測定腺苷三磷酸(ATP)含量 實驗2 薄層層析法分離核苷酸 實驗3 離子交換柱層析分離單核苷酸 實驗4 5'核苷酸含量測定(過碘酸氧化法) 4.2 核酸含量的測定 實驗1 定磷法測定核酸含量 實驗2 紫外分光光度法測定核酸含量 4.3 核酸的提取及分析 實驗1 動物肝DNA的提取及含量測定(二苯胺法) 實驗2 酵母RNA的提取及組成成分鑒定 實驗3 動物肝組織中核酸的制備與測定第五模塊 酶學(xué)及維生素實驗技術(shù) 5.1 酶的性質(zhì)實驗 實驗1 溫度與pH對唾液淀粉酶活性的影響 實驗2 酶的專一性 實驗3 唾液淀粉酶的激活與抑制作用 5.2 酶 促反應(yīng)動力學(xué)實驗 實驗1 影響酶活力的因素——正交實驗法 實驗2 胰蛋白酶米氏常數(shù)的測定 實驗3 過氧化氫酶米氏常數(shù)測定 5.3 酶活力的測定 實驗1 淀粉酶的活力測定 實驗2 酸性磷酸酯酶活力測定 實驗3 膽堿酯酶活力測定 實驗4 肝丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)活性測定 實驗5 血清氨基轉(zhuǎn)移酶活性的測定——賴氏比色法 實驗6 超氧化物歧化酶(SOD)活力測定 實驗7 溶菌酶的分離純化和活力測定 5.4 同工酶分析 實驗1 瓊脂糖凝膠電泳法分離LDH同工酶及血清LDH總活力的測定 實驗2 植物過氧化物酶同工酶測定(凝膠圓盤電泳) 5.5 維生素的定量測定 實驗1 維生素B1的定量測定(熒光光度法) 實驗2 維生素B2的定量測定(熒光光度法) 實驗3 2,6-二氯酚靛酚法測定維生素C含量 實驗4 磷鉬藍法測定維生素C含量第六模塊 物質(zhì)代謝實驗技術(shù) 6.1 糖代謝實驗 實驗1 肌糖原酵解作用 實驗2 胰島素、腎上腺素對血糖濃度的影響 實驗3 發(fā)酵過程無機磷的利用 6.2 脂質(zhì)代謝實驗 實驗1 油料種子脂肪轉(zhuǎn)化為糖的定性實驗 實驗2 脂肪酸β-氧化的測定第七模塊 常見生物活性物質(zhì)分離分析技術(shù) 實驗1 花色素的分離、純化與測定 實驗2 熊果酸的制備和測定 實驗3 兒茶素的提取和測定 實驗4 血紅素的提取和測定 實驗5 番茄紅素的提取和測定 實驗6 大豆皂苷的提取和測定 實驗7 阿魏酸的提取和測定第八模塊 分子生物學(xué)基礎(chǔ)實驗技術(shù) 8.1 植物基因組DNA和質(zhì)粒DNA的提取及回收 實驗1 SDS(十二烷基硫酸鈉)法提取植物基因組DNA 實驗2 CTAB(十六烷基三乙基溴化銨)法提取植物總DNA 實驗3 堿裂解法提取質(zhì)粒DNA 實驗4 煮沸法提取質(zhì)粒DNA 實驗5 低熔點瓊脂糖法回收DNA 實驗6 透析袋法回收DNA 8.2 RNA的提取及其鑒定 實驗1 植物總RNA提取(Trizol法)及其電泳鑒定 實驗2 哺乳動物mRNA的制備和純化 實驗3 RNA分子雜交(Northern blotting) 8.3 基因擴增及擴增產(chǎn)物的檢測 實驗1 PCR擴增基因及擴增產(chǎn)物的電泳檢測 實驗2 水稻Actin基因的RT-PCR及電泳檢測 8.4 DNA重組、轉(zhuǎn)化及原核表達 實驗1 大腸桿菌感受態(tài)細胞的制備及質(zhì)粒DNA的轉(zhuǎn)化 實驗2 禽流感病毒HA1基因原核表達載體的構(gòu)建及在大腸桿菌中的誘導(dǎo)表達第九模塊 設(shè)計性實驗選題 選題1 不同環(huán)境條件對水果維生素C含量的影響 選題2 綠色植物色素的分離與鑒定 選題3 卵磷脂的提取和鑒定 選題4 殼聚糖的制備及性質(zhì)鑒定 選題5 食用真菌多糖的制備、純化及性質(zhì)鑒定 選題6 細胞膜的制備及其成分(磷脂、膽固醇)分析 選題7 植物凝集素的提取及生物學(xué)活性研究 選題8 花生油是否摻雜棉子油的初步鑒定 選題9 螺旋藻藻藍蛋白的分離、純化與鑒定 選題10 奶粉中真實蛋白質(zhì)含量測定方法研究 選題11 血清白蛋白的分離、純化與鑒定 選題12 植物α-淀粉酶抑制劑的分離及活性研究 選題13 血液乙酰膽堿酯酶的分離純化及活力測定 選題14 離子交換層析法純化堿性磷酸酶 選題15 豬胰糜蛋白酶的制備和純度鑒定 選題16 多酚氧化酶(PPO)的制備和活力測定 選題17 溶菌酶的制備及其酶活力測定 選題18 牛心線粒體分離、組分分離和酶學(xué)分析 選題19 水稻某-基因的簡單克隆分析 選題20 豬胰島素基因的原核表達載體的構(gòu)建第十模塊 實驗論文撰寫附錄 1 常用緩沖液的配制 2 常用標準溶液的配制與標定 3 常用酸堿指示劑 4 市售酸堿試劑的濃度與比重主要參考文獻參考網(wǎng)頁地址