全書分為概述、微生物實驗和附錄三部分。概述主要講述微生物實驗課程開設(shè)的目的與意義、相關(guān)實驗記錄與報告的規(guī)范、實驗室規(guī)則及安全注意事項、生物安全等內(nèi)容。實驗部分精選了微生物實驗的無菌環(huán)境和操作,微生物實驗的重要儀器,顯微鏡使用和形態(tài)學(xué)觀察,微生物的培養(yǎng)、分離及生長,微生物遺傳學(xué)技術(shù),分子生物學(xué)技術(shù),微生物檢測和鑒定,微生物技術(shù)的應(yīng)用等相關(guān)內(nèi)容的實驗。附錄內(nèi)容包括常用染色液的配制、常用培養(yǎng)基配方、常用緩沖液的配制。
全書分為概述、微生物實驗和附錄三部分。概述主要講述微生物實驗課程開設(shè)的目的與意義、相關(guān)實驗記錄與報告的規(guī)范、實驗室規(guī)則及安全注意事項、生物安全等內(nèi)容。實驗部分精選了微生物實驗的無菌環(huán)境和操作,微生物實驗的重要儀器,顯微鏡使用和形態(tài)學(xué)觀察,微生物的培養(yǎng)、分離及生長,微生物遺傳學(xué)技術(shù),分子生物學(xué)技術(shù),微生物檢測和鑒定,微生物技術(shù)的應(yīng)用等相關(guān)內(nèi)容的實驗。既有涉及對加強學(xué)生微生物實驗基本操作和技能的傳統(tǒng)實驗,也有一些設(shè)計型和綜合型實驗。這些實驗既可以單獨進(jìn)行,也可以組合起來成為綜合型實驗,便于安排教學(xué)。附錄內(nèi)容包括常用染色液的配制、常用培養(yǎng)基配方、常用緩沖液的配制,可供讀者參考。
本書以綜合性大學(xué)、師范、醫(yī)藥和農(nóng)林院校有關(guān)專業(yè)的大學(xué)本科生為對象,在編寫的時候總結(jié)了編者三十多年的微生物實驗教學(xué)經(jīng)驗及學(xué)生參加工作后的反饋建議,注重操作細(xì)節(jié)的描述,以實現(xiàn)操作的可重復(fù)性。本書也可供其他微生物實驗技術(shù)工作者參考。同時本書在每個實驗中都設(shè)計了預(yù)習(xí)思考題,以幫助學(xué)生對理論課上學(xué)到的知識進(jìn)行總結(jié)歸納,將實驗知識與理論教學(xué)更好地聯(lián)系在一起。本書可作為微生物實驗課程的教材,也可以作為微生物實驗技術(shù)的工具書。
本書第一章、第四
葉蕊芳,上海梅隴路130號華東理工大學(xué)259信箱,教授。
1.微生物學(xué),1990年至今,本科生,48,華東理工大學(xué)
2.微生物學(xué)實驗,1990年至今,本科生,32,華東理工大學(xué)
3.生命科學(xué)導(dǎo)論,2000年至2005年,32,華東理工大學(xué)
概述1
第一章微生物實驗的無菌環(huán)境和操作5
第一節(jié)微生物實驗的無菌環(huán)境5
一、無菌室5
二、超凈工作臺6
三、環(huán)境無菌檢測的方法8
第二節(jié)微生物實驗的無菌操作14
一、無菌操作前的準(zhǔn)備工作14
二、滅菌和消毒方法14
第二章微生物實驗的重要儀器23
一、普通光學(xué)顯微鏡23
二、高壓蒸汽滅菌鍋24
三、 移液器25
四、電子天平27
五、 pH計28
六、分光光度計29
七、超凈工作臺30
八、恒溫培養(yǎng)箱30
九、搖瓶培養(yǎng)設(shè)備30
十、冰箱及超低溫冰箱31
十一、離心機32
十二、真空冷凍干燥機33
十三、PCR儀34
十四、 厭氧培養(yǎng)箱35
十五、生物安全柜36
十六、電熱恒溫干燥箱37
第三章顯微鏡使用和形態(tài)學(xué)觀察39
實驗一普通光學(xué)顯微鏡的使用41
實驗二暗視野顯微鏡的使用47
實驗三相差顯微鏡的使用50
實驗四微分干涉差顯微鏡的使用53
實驗五熒光顯微鏡的使用56
實驗六微生物大小測定59
實驗七微生物的形態(tài)觀察63
實驗八微生物染色技術(shù)66
第四章微生物的培養(yǎng)、分離及生長72
實驗九培養(yǎng)基的配制和高壓蒸汽滅菌73
實驗十微生物的接種分離和純培養(yǎng)78
實驗十一亨蓋特法厭氧培養(yǎng)基的制備82
實驗十二厭氧微生物的分離培養(yǎng)86
實驗十三噬菌體的分離純化和效價測定90
實驗十四微生物的計數(shù)——血細(xì)胞計數(shù)法93
實驗十五微生物的計數(shù)——平板活菌計數(shù)法96
實驗十六比濁法測定細(xì)菌生長曲線99
實驗十七干重和濕重法測定微生物的生長量102
第五章微生物遺傳學(xué)技術(shù)104
實驗十八微生物的誘變和突變株的篩選105
實驗十九營養(yǎng)缺陷型突變株的選育108
實驗二十菌種保藏技術(shù)112第六章分子生物學(xué)技術(shù)119
一、目的基因的獲得119
二、載體系統(tǒng)的選擇119
三、目的基因與載體的重組119
四、重組載體引入受體細(xì)胞120
五、重組受體細(xì)胞的篩選和鑒定120
六、目的基因在受體細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)120
實驗二十一細(xì)菌總DNA的提取和瓊脂糖凝膠電泳121
實驗二十二基本PCR技術(shù)擴增DNA片段124
實驗二十三堿裂解法和試劑盒法提取質(zhì)粒DNA126
實驗二十四DNA分子的限制性內(nèi)切酶消化、片段純化、連接130
實驗二十五感受態(tài)細(xì)胞的制備133
實驗二十六重組DNA轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞135
第七章微生物檢測和鑒定137
實驗二十七微生物的營養(yǎng)及生理生化反應(yīng)138
實驗二十八應(yīng)用API20E細(xì)菌鑒定系統(tǒng)鑒定腸桿菌科和部分其他革蘭氏陰性桿菌142
實驗二十九以細(xì)菌16S rRNA序列和真菌ITS序列為基礎(chǔ)的菌種鑒定146
第八章微生物技術(shù)的應(yīng)用150
實驗三十土壤中纖維素分解菌的分離151
實驗三十一食品樣品中菌落總數(shù)的測定159
實驗三十二食品樣品中大腸菌群MPN值的測定161
實驗三十三原生質(zhì)體的制備167
實驗三十四原生質(zhì)體的融合169
附錄Ⅰ常用染色液的配制171
附錄Ⅱ常用培養(yǎng)基配方173
附錄Ⅲ常用緩沖液的配制176
參考文獻(xiàn)178