第一章

家蠶與家蠶轉(zhuǎn)基因

第一節(jié)家蠶

第二節(jié)家蠶轉(zhuǎn)基因

一、家蠶轉(zhuǎn)基因的特點/

二、家蠶轉(zhuǎn)基因的早期研究/

三、家蠶轉(zhuǎn)基因研究現(xiàn)狀與發(fā)展/

參考文獻(xiàn)

第二章

家蠶轉(zhuǎn)基因的載體構(gòu)建

第一節(jié)目的基因的獲得

一、從基因組DNA文庫獲取目的基因/

二、從cDNA文庫獲取目的基因/

三、通過PCR技術(shù)分離目的基因/

四、利用電子克隆獲取目的基因/

五、人工合成目的基因/

第二節(jié)啟動子的選擇

一、組成型啟動子/

二、誘導(dǎo)型啟動子/

三、組織特異性啟動子/

四、家蠶RNA聚合酶Ⅲ啟動子/

第三節(jié)標(biāo)記基因

一、熒光蛋白基因/

二、熒光素酶基因/

三、抗性篩選基因/

四、其他可視化標(biāo)記基因/

第四節(jié)調(diào)控元件

一、內(nèi)含子/

二、增強(qiáng)子/

三、非翻譯區(qū)/

四、絕緣子/

五、其他調(diào)控元件/

第五節(jié)家蠶轉(zhuǎn)基因常用載體

一、轉(zhuǎn)座載體/

二、基因打靶載體/

三、人工核酸酶表達(dá)載體/

四、其他類型載體/

第六節(jié)轉(zhuǎn)基因載體構(gòu)建流程

一、pSL-FibH-EGFP-LBS中間載體的構(gòu)建/

二、piggyBac重組轉(zhuǎn)座載體的構(gòu)建/

參考文獻(xiàn)

第三章

家蠶外源基因?qū)�入技術(shù)

第一節(jié)胚胎顯微注射技術(shù)

一、家蠶胚胎顯微注射儀器的誕生與發(fā)展/

二、家蠶胚胎顯微注射操作流程/

第二節(jié)精子介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)移技術(shù)

一、家蠶精子介導(dǎo)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的建立/

二、家蠶精子介導(dǎo)轉(zhuǎn)基因操作流程/

第三節(jié)其他外源基因?qū)�入技術(shù)

一、電穿孔法/

二、壓力滲透法/

三、基因槍法/

四、病毒介導(dǎo)法/

五、脈沖場電泳法/

參考文獻(xiàn)

第四章

轉(zhuǎn)基因家蠶的篩選與鑒定

第一節(jié)轉(zhuǎn)基因家蠶的篩選

一、熒光標(biāo)記/

二、顯性顏色變化標(biāo)記/

三、其他表型變化識別標(biāo)記/

第二節(jié)外源基因的整合與表達(dá)分析

一、外源基因的整合分析/

二、外源基因的表達(dá)分析/

第三節(jié)外源基因表達(dá)產(chǎn)物的生物活性及功能檢測

一、表達(dá)產(chǎn)物的生物活性分析/

二、表達(dá)產(chǎn)物的功能測試/

第四節(jié)內(nèi)源基因定點突變家蠶的鑒定

一、T7E1酶切鑒定內(nèi)源基因定點突變家蠶/

二、其他鑒定突變個體的核酸內(nèi)切酶/

三、限制性內(nèi)切酶酶切檢測法/

參考文獻(xiàn)

第五章

基于轉(zhuǎn)座子系統(tǒng)的家蠶基因功能分析技術(shù)

第一節(jié)GAL4/UAS雙元調(diào)控技術(shù)

一、GAL4/UAS系統(tǒng)的基本原理/

二、家蠶GAL4/UAS系統(tǒng)的建立/

第二節(jié)轉(zhuǎn)基因RNAi技術(shù)

第三節(jié)序列捕獲技術(shù)

第四節(jié)基因特異表達(dá)調(diào)控技術(shù)

一、熱激誘導(dǎo)表達(dá)技術(shù)/

二、四環(huán)素誘導(dǎo)表達(dá)技術(shù)/

參考文獻(xiàn)

第六章

家蠶基因組編輯技術(shù)

第一節(jié)家蠶條件基因打靶技術(shù)

一、位點特異性重組系統(tǒng)概述/

二、基于位點特異性重組系統(tǒng)的家蠶條件基因打靶策略/

第二節(jié)家蠶基因組靶向編輯技術(shù)

一、基因組靶向編輯技術(shù)概述/

二、家蠶基因組靶向編輯技術(shù)的建立與發(fā)展/

第三節(jié)家蠶基因組編輯技術(shù)的優(yōu)缺點及其發(fā)展趨勢

參考文獻(xiàn)

第七章

轉(zhuǎn)基因家蠶新品種培育

第一節(jié)轉(zhuǎn)基因有色繭家蠶新品種培育

一、基于色素轉(zhuǎn)運獲得的轉(zhuǎn)基因有色繭/

二、轉(zhuǎn)熒光蛋白基因有色繭品種培育/

第二節(jié)高機(jī)械性能轉(zhuǎn)基因繭絲家蠶新品種培育

一、轉(zhuǎn)蜘蛛絲蛋白基因改良繭絲機(jī)械性能/

二、轉(zhuǎn)羊毛角蛋白相關(guān)蛋白基因改良繭絲機(jī)械性能與染色性能/

第三節(jié)實用性蠶品種轉(zhuǎn)基因技術(shù)的建立與應(yīng)用

一、實用性蠶品種轉(zhuǎn)基因技術(shù)的建立/

二、實用性蠶品種轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用/

第四節(jié)其他轉(zhuǎn)基因家蠶新品種培育

一、抗病性轉(zhuǎn)基因家蠶品種培育/

二、提高蠶絲產(chǎn)量的轉(zhuǎn)基因家蠶品種培育/

三、用作藥物篩選模型的轉(zhuǎn)基因家蠶品種培育/

參考文獻(xiàn)

第八章

轉(zhuǎn)基因家蠶生物反應(yīng)器

第一節(jié)絲腺生物反應(yīng)器

一、絲腺特異表達(dá)系統(tǒng)/

二、絲腺生物反應(yīng)器表達(dá)的外源蛋白/

第二節(jié)脂肪體生物反應(yīng)器

第三節(jié)轉(zhuǎn)基因蠶表達(dá)外源蛋白存在的問題

參考文獻(xiàn)

第九章

家蠶基因功能鑒定與應(yīng)用

第一節(jié)絲蛋白合成與分泌機(jī)理

一、絲蛋白基因表達(dá)與調(diào)控/

二、繭絲突變家蠶的突變機(jī)理/

三、絲腺離子環(huán)境變化對蠶絲分泌的影響/

第二節(jié)變態(tài)發(fā)育與激素調(diào)節(jié)

一、家蠶保幼激素調(diào)控研究/

二、家蠶蛻皮激素調(diào)控研究/

三、其他家蠶變態(tài)發(fā)育相關(guān)神經(jīng)肽激素調(diào)控研究/

第三節(jié)性別決定與調(diào)控

一、Bmdsx基因的功能分析/

二、基于Bmdsx基因的性別調(diào)控研究/

三、性別特異性基因啟動子鑒定研究/

第四節(jié)抗病機(jī)理研究

一、家蠶內(nèi)源抗病或免疫相關(guān)基因功能鑒定/

二、病毒抗性相關(guān)基因啟動子鑒定研究/

第五節(jié)食性及化學(xué)感受受體研究

一、桑樹尿素酶基因在家蠶體內(nèi)表達(dá)研究/

二、家蠶化學(xué)感受受體研究/

參考文獻(xiàn)

第十章

家蠶安全轉(zhuǎn)基因技術(shù)體系的建立與應(yīng)用

第一節(jié)轉(zhuǎn)基因家蠶存在的主要安全問題

一、轉(zhuǎn)基因家蠶自身安全性問題/

二、轉(zhuǎn)基因家蠶帶來的生態(tài)環(huán)境安全隱患/

第二節(jié)基于條件基因打靶的家蠶安全轉(zhuǎn)基因體系建立

一、克服轉(zhuǎn)座子隨機(jī)整合引起的家蠶轉(zhuǎn)基因安全隱患/

二、克服篩選標(biāo)記基因保留帶來的家蠶轉(zhuǎn)基因安全隱患/

三、實現(xiàn)外源基因穩(wěn)定整合、表達(dá)以及精確替換的家蠶安全轉(zhuǎn)基因策略/

第三節(jié)家蠶安全轉(zhuǎn)基因技術(shù)的發(fā)展趨勢

一、不同位點特異性重組系統(tǒng)的聯(lián)合應(yīng)用/

二、基因組靶向編輯技術(shù)與位點特異性重組系統(tǒng)的聯(lián)合應(yīng)用/

參考文獻(xiàn)

第十一章

家蠶細(xì)胞轉(zhuǎn)基因技術(shù)及其應(yīng)用

第一節(jié)家蠶細(xì)胞系種類與特征

第二節(jié)家蠶細(xì)胞轉(zhuǎn)基因技術(shù)的建立

一、常用載體/

二、家蠶細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法/

第三節(jié)家蠶轉(zhuǎn)基因細(xì)胞的應(yīng)用

一、家蠶轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系/

二、基因功能研究/

三、高效表達(dá)外源蛋白/

參考文獻(xiàn)

第十二章

轉(zhuǎn)基因家蠶的安全評價與安全管理

第一節(jié)概述

一、轉(zhuǎn)基因生物及其安全性/

二、轉(zhuǎn)基因生物安全性評價與安全管理/

第二節(jié)安全評價

一、評價體系/

二、評價原則/

三、評價內(nèi)容和方法/

第三節(jié)安全管理

一、安全管理的目標(biāo)、任務(wù)和原則/

二、我國的安全管理體系/

三、安全管理的理念與問題/

第四節(jié)我國轉(zhuǎn)基因家蠶的安全評價與管理

一、我國轉(zhuǎn)基因家蠶的安全評價與管理現(xiàn)狀/

二、我國轉(zhuǎn)基因家蠶實驗室研究的安全管理/

參考文獻(xiàn)

后記