本書分為三篇共三十七個實驗。第一篇為免疫學基礎實驗,包括血清總補體溶血活性(CH50)的測定等七個實驗;第二篇為病原生物學基礎實驗,包括細菌的接種、培養(yǎng)與生化反應等二十二個實驗;第三篇為綜合性實驗,包括多克隆抗體的制備及效價測定等七個實驗。書后還有附錄和部分實驗結果的彩圖。所有內容均用中文和英文兩種語言編寫。本書不僅可作為高等醫(yī)學院校臨床醫(yī)學、醫(yī)學檢驗技術、中西醫(yī)臨床醫(yī)學等專業(yè)的病原生物學與免疫學實驗教材,還可作為醫(yī)院、衛(wèi)生防疫部門中從事病原生物學與免疫學工作的技術人員的參考書。
本教材編寫中著力體現(xiàn)如下特色:1. 形態(tài)學觀察,體現(xiàn)數(shù)碼互動實驗室等新技術新手段;2. 接種培養(yǎng),展望細菌自動接種、基于生化反應的自動鑒定系統(tǒng)和自動藥敏系統(tǒng);3. 病原的分子檢測,體現(xiàn)或展望基于抗原抗體檢測的自動化流水線,基于代謝產物檢測的質譜;以及基于核酸檢測的熒光定量(RT)或數(shù)字PCR等;4. 驗證實驗體現(xiàn)科學性和體系性,綜合實驗體現(xiàn)探索性和創(chuàng)新性;5. 教育理念,體現(xiàn)標本采集的科學性與倫理性、實驗過程及廢棄物處理的生物安全、動物實驗的動物倫理等課程思政和生物安全元素。
病原生物學與免疫學實驗是重要的醫(yī)學實踐課程,也是醫(yī)學相關專業(yè)本科生必須掌握的專業(yè)基礎課程。實施雙語教學是我國高等教育國際化發(fā)展的必然趨勢。為了適應新醫(yī)科背景下卓越醫(yī)學人才培養(yǎng)新格局及教育教學改革和創(chuàng)新的需要,本書遵循實用性、科學性、啟發(fā)性和時代性的原則,將醫(yī)學免疫學、醫(yī)學微生物學和人體寄生蟲學的主要實驗內容整合,注重實驗技能的培養(yǎng)、專業(yè)知識和課程思政元素的融合,并以中英雙語的形式編寫,有助于醫(yī)學生掌握病原生物學和免疫學診斷的基本原理和相關實驗技能,提高科技英文水平。本書不僅可作為高等醫(yī)學院校臨床醫(yī)學、醫(yī)學檢驗技術、中西醫(yī)臨床醫(yī)學等專業(yè)學生的病原生物學與免疫學實驗教材,還可作為醫(yī)院、衛(wèi)生防疫部門中從事病原生物學與免疫學工作的技術人員的參考書。本教材的編寫和出版得到了揚州大學卓越本科課程建設工程項目(2022ZYKCC36)、揚州大學重點教材項目(201824)和揚州大學出版基金資助,我們對此表示衷心地感謝。由于實驗教學仍處于不斷探索之中以及編者水平有限,書中不足之處在所難免,敬請廣大讀者提出寶貴意見。
李國才,男,教授,博士研究生導師,揚州大學卓越課程C層次臨床微生物學檢驗(2022年)負責人;江蘇高校省級外國留學生英文授課精品課程病原生物學(2017年)負責人;江蘇省成人高等教育精品資源共享課程病原生物學與免疫學(2017年)負責人;揚州大學英語授課品牌課程病原生物學(2015年)負責人。
第一篇免疫學基礎實驗/1實驗一血清總補體溶血活性(CH50)的測定/1實驗二人外周血單個核細胞的分離/3實驗三E花環(huán)形成試驗/5實驗四中性粒細胞吞噬功能測定/7實驗五雙向瓊脂擴散試驗/8實驗六PCRSSP法檢測HLAA*02基因/9實驗七利用SPA親和層析法分離純化IgG抗體/11實驗八人血清總IgE檢測/12第二篇病原生物學基礎實驗/14實驗一細菌的生理/14實驗二細菌分布及外界因素對細菌的影響/19實驗三細菌形態(tài)結構的檢查/22實驗四化膿性球菌/24實驗五腸道桿菌/26實驗六厭氧性細菌/30實驗七分枝桿菌/31實驗八其他細菌/32實驗九病毒/34實驗十真菌/35實驗十一內毒素檢測(鱟試驗)/37實驗十二寄生關系及寄生蟲演化/40實驗十三吸蟲/41實驗十四絳蟲/44實驗十五線蟲/46實驗十六常見蠕蟲的檢驗方法/49實驗十七阿米巴/55實驗十八孢子蟲/57實驗十九鞭毛蟲/60實驗二十纖毛蟲/62實驗二十一原蟲檢查方法/62實驗二十二醫(yī)學節(jié)肢動物/65第三篇綜合性實驗/71實驗一多克隆抗體的制備及效價測定/71實驗二流式細胞術檢測小鼠脾臟T、B細胞的比例/73實驗三呼吸道感染常見病原微生物的實驗室檢查/74實驗四腸道桿菌的分離鑒定/78實驗五泌尿生殖道感染常見病原微生物的實驗室檢查/82實驗六皮膚創(chuàng)傷感染常見細菌的實驗室檢查/84實驗七日本血吸蟲感染小鼠致病及免疫學診斷/86ContentsChapter 1Basic Experiments of Immunology/88Experiment 1Measure of the 50% Haemolytic Complement (CH50) Activity of Serum/88Experiment 2Isolation of Human Peripheral Blood Mononuclear Cells/91Experiment 3Erosette Forming Test/92Experiment 4Neutrophil Phagocytosis Test/95Experiment 5Double Immunodiffusion Test/97Experiment 6Detect the HLAA*02 Gene by PCRSSP/98Experiment 7Purify IgG Antibody by SPA Affinity Chromatography/100Experiment 8Detection of Total IgE in Human Serum/102Chapter 2Basic Experiments of Pathogenic Biology/104Experiment 1Physiology of Bacteria/104Experiment 2The Distribution of Bacteria and the Effect of External Factors on Bacteria/112Experiment 3Examination of Bacterial Morphology and Structure/116Experiment 4Pyogenic Coccus/118Experiment 5Enterobacteriaceae/122Experiment 6Anaerobic bacteria/126Experiment 7Mycobacterium/127Experiment 8Other bacteria/129Experiment 9Virus/132Experiment 10Fungi/134Experiment 11Test of Endotoxin (Limulus Amoebocyte Lysate Test)/136Experiment 12Parasitic Relationships and Parasite Evolution/139Experiment 13Trematode/140Experiment 14Tapeworm/146Experiment 15Nematode/148Experiment 16Examination of Helminths/152Experiment 17Amoeba/160Experiment 18Sporozoa/163Experiment 19Flagellates/166Experiment 20Ciliates/168Experiment 21Methods for Protozoa Diagnosis/169Experiment 22Medical Arthropods/173Chapter 3Comprehensive Experiment/175Experiment 1Preparation and Titer Determination of Polyclonal Antibody/175Experiment 2Measure the Ratio of T and B Cells in the Spleen by Flow Cytometry/177Experiment 3Laboratory Examination of Common Pathogenic Microorganism of Respiratory Tract Infection/179Experiment 4Isolation and Identification of Enterobacteriaceae/184Experiment 5Laboratory Examination of Common Pathogens of Genitourinary Tract Infection/190Experiment 6Laboratory Examination of Common Bacteria in Skin Wound Infections/193Experiment 7Pathogenic and Immunological Diagnosis of Mice Infected with Schistosoma japonicum/196附錄A常用染色液和試劑的配制/199附錄B常用培養(yǎng)基的配制/201Appendix APreparation of Common Staining Solution and Reagents/203Appendix BPreparation of Common Culture Medium/205部分實驗結果的彩圖/208Color Figures of Some Experimental Results/208參考文獻/225